轉(zhuǎn)基因豬制備技術(shù)

定　價(jià)：￥78.00

作　者：	魏慶信，鄭新民主編
出版社：	中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社
叢編項(xiàng)：
標(biāo)　簽：	農(nóng)業(yè)/林業(yè) 畜牧/狩獵/蠶/蜂

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ISBN：	9787109181014	出版時(shí)間：	2013-10-01	包裝：
開(kāi)本：		頁(yè)數(shù)：		字?jǐn)?shù)：

內(nèi)容簡(jiǎn)介

　　《轉(zhuǎn)基因豬制備技術(shù)》由魏慶信、鄭新民主編，本書首先概述了轉(zhuǎn)基因動(dòng)物和轉(zhuǎn)基因豬的產(chǎn)生、技術(shù)發(fā)展和應(yīng)用概況，然后介紹了與轉(zhuǎn)基因豬制備相關(guān)的配子與胚胎操作技術(shù)以及基因工程技術(shù)。在此基礎(chǔ)上，著重闡述了轉(zhuǎn)基因豬的各種構(gòu)建技術(shù)及檢測(cè)技術(shù)。轉(zhuǎn)基因豬研究的最終目標(biāo)是培育新品種并在養(yǎng)豬生產(chǎn)中應(yīng)用，因此論述了在獲得原代轉(zhuǎn)基因豬之后，新品種培育的理論、方法和途徑。由于轉(zhuǎn)基因生物的安全性意義重大，本書將轉(zhuǎn)基因豬的安全調(diào)控技術(shù)及安全管理和安全評(píng)價(jià)作為獨(dú)立的兩章，分別進(jìn)行了敘述和討論。本書突出了實(shí)用性和可操作性，將技術(shù)操作方面的內(nèi)容作為重點(diǎn)，在闡述高技術(shù)層面操作的同時(shí)，兼顧了常規(guī)技術(shù)層面和基本技能的操作?！掇D(zhuǎn)基因豬制備技術(shù)》可為農(nóng)業(yè)、醫(yī)學(xué)和基礎(chǔ)生物學(xué)領(lǐng)域相關(guān)的研究、推廣、生產(chǎn)和管理人員提供參考，也可作為有關(guān)專業(yè)的本科生和研究生參考教材。

作者簡(jiǎn)介

　　魏慶信男，1945年出生，1970年北京農(nóng)業(yè)大學(xué)畜牧專業(yè)本科畢業(yè)，現(xiàn)為湖北省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所研究員。長(zhǎng)期從事動(dòng)物繁殖研究和技術(shù)推廣，從20世紀(jì)90年代后期開(kāi)始轉(zhuǎn)基因動(dòng)物研究，先后承擔(dān)國(guó)家“863計(jì)劃”、自然科學(xué)基金、轉(zhuǎn)基因生物新品種培育專項(xiàng)和湖北省科技廳等的相關(guān)研究課題20余項(xiàng)，在國(guó)內(nèi)率先建立豬胚胎移植、豬微注射胚胎自體移植和豬胚胎細(xì)胞核移植等技術(shù)，較早建立了轉(zhuǎn)基因豬工作平臺(tái)和技術(shù)體系，先后獲得生長(zhǎng)激素、人類促衰變因子、抗豬瘟病毒、人血清白蛋白及ω-3脂肪酸去飽和酶等多種轉(zhuǎn)基因豬。鄭新民男，1960年出生，1992年西北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物遺傳育種專業(yè)碩士畢業(yè)，19961998年作為訪問(wèn)學(xué)者在美國(guó)奧本大學(xué)農(nóng)學(xué)院動(dòng)物基因工程實(shí)驗(yàn)室工作。現(xiàn)任湖北省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所研究員、副所長(zhǎng)，動(dòng)物胚胎工程及分子育種湖北省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室主任。先后承擔(dān)國(guó)家“863計(jì)劃”、自然科學(xué)基金、轉(zhuǎn)基因生物新品種培育專項(xiàng)和湖北省科技廳等的有關(guān)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的研究課題10佘項(xiàng)，建立了相關(guān)的基因構(gòu)建、轉(zhuǎn)基因、分子檢測(cè)等技術(shù)體系，在國(guó)內(nèi)率先獲得高表達(dá)的人血清白蛋白、sFatI和IGF基因豬，獲多項(xiàng)發(fā)明專利。

圖書目錄

序
前言
第一章概述
第一節(jié) 轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的產(chǎn)生和發(fā)展
一、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的產(chǎn)生
二、動(dòng)物轉(zhuǎn)基因技術(shù)的發(fā)展
三、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物應(yīng)用領(lǐng)域的拓展
第二節(jié) 轉(zhuǎn)基因豬技術(shù)現(xiàn)狀及應(yīng)用前景
一、轉(zhuǎn)基因豬技術(shù)現(xiàn)狀
二、轉(zhuǎn)基因豬的應(yīng)用現(xiàn)狀與前景
參考文獻(xiàn)
第二章豬的配子與胚胎操作技術(shù)
第一節(jié) 豬精液的采集、保存和輸精技術(shù)
一、豬精液的采集
二、精液的質(zhì)量檢查和評(píng)定序前言第一章概述第一節(jié) 轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的產(chǎn)生和發(fā)展一、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的產(chǎn)生二、動(dòng)物轉(zhuǎn)基因技術(shù)的發(fā)展三、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物應(yīng)用領(lǐng)域的拓展第二節(jié) 轉(zhuǎn)基因豬技術(shù)現(xiàn)狀及應(yīng)用前景一、轉(zhuǎn)基因豬技術(shù)現(xiàn)狀二、轉(zhuǎn)基因豬的應(yīng)用現(xiàn)狀與前景參考文獻(xiàn) 第二章豬的配子與胚胎操作技術(shù) 第一節(jié) 豬精液的采集、保存和輸精技術(shù) 一、豬精液的采集二、精液的質(zhì)量檢查和評(píng)定三、精液的保存四、輸精技術(shù) 第二節(jié) 母豬的同期發(fā)情和超數(shù)排卵技術(shù) 一、母豬的同期發(fā)情技術(shù) 二、母豬的超數(shù)排卵技術(shù) 第三節(jié) 豬胚胎的采集和移植技術(shù) 一、胚胎的采集二、胚胎的移植第四節(jié) 豬卵母細(xì)胞體外成熟及體外受精技術(shù) 一、豬卵母細(xì)胞的采集二、豬卵母細(xì)胞的體外成熟三、豬精子的體外獲能四、體外受精技術(shù) 五、胞質(zhì)內(nèi)單精注射技術(shù) 第五節(jié) 豬體細(xì)胞核移植(克隆)技術(shù) 一、供體細(xì)胞的選擇二、供體細(xì)胞的制備方法三、受體細(xì)胞的制備四、核移植操作技術(shù) 五、融合及激活技術(shù) 六、手工克隆技術(shù) 七、重構(gòu)胚的培養(yǎng) 八、重構(gòu)胚的移植九、豬體細(xì)胞核移植存在的問(wèn)題及應(yīng)用前景第六節(jié) 豬的iPS技術(shù) 一、iPS細(xì)胞的制備技術(shù) 二、豬iPS技術(shù)的應(yīng)用前景三、iPS細(xì)胞目前存在的問(wèn)題第七節(jié) 配子與胚胎操作的環(huán)境控制一、影響配子與胚胎操作的環(huán)境因素二、滅菌技術(shù) 三、玻璃及塑料制品的清洗四、配子與胚胎操作室的設(shè)計(jì)及環(huán)境管理參考文獻(xiàn) 第三章豬的基因工程技術(shù) 第一節(jié) 轉(zhuǎn)基因豬表達(dá)載體的構(gòu)建一、目的基因及其全長(zhǎng)序列的獲取二、啟動(dòng)子的選擇三、報(bào)告基因四、調(diào)控元件五、動(dòng)物基因工程常用載體六、載體構(gòu)建的一般流程第二節(jié) 基因打靶技術(shù)及其策略一、基因打靶載體的類型和構(gòu)建方法二、胚胎干細(xì)胞基因打靶三、體細(xì)胞基因打靶四、基因打靶技術(shù)的發(fā)展及復(fù)雜調(diào)控五、基因打靶技術(shù)的應(yīng)用和展望第三節(jié) RNAi基因沉默載體的構(gòu)建一、RNAi的研究二、RNAi的分子機(jī)制三、shRNA表達(dá)載體構(gòu)建四、基因沉默技術(shù)在豬遺傳改良上的應(yīng)用第四節(jié) 其他豬基因組靶向修飾技術(shù) 一、鋅指核酸酶二、TALEN 三、PhiC31整合酶參考文獻(xiàn) 第四章豬的轉(zhuǎn)基因技術(shù) 第一節(jié) 顯微注射法一、原核胚的獲取二、基因的顯微注射三、注射胚的移植四、原核注射法制備轉(zhuǎn)基因豬的效率五、提高轉(zhuǎn)基因效率的措施六、通過(guò)顯微注射法實(shí)現(xiàn)基因的定位修飾和整合第二節(jié) 豬精子介導(dǎo)法一、精子介導(dǎo)轉(zhuǎn)基因的機(jī)理二、精子介導(dǎo)制備轉(zhuǎn)基因豬的方法第三節(jié) 體細(xì)胞核移植介導(dǎo)法一、供體細(xì)胞的選擇及建系二、細(xì)胞的基因轉(zhuǎn)染三、細(xì)胞篩選和陽(yáng)性單克隆培養(yǎng) 第四節(jié) 逆轉(zhuǎn)錄病毒感染法一、逆轉(zhuǎn)錄病毒載體的構(gòu)建二、利用逆轉(zhuǎn)錄病毒載體制備轉(zhuǎn)基因豬的路徑第五節(jié) 其他制備轉(zhuǎn)基因豬的方法一、精原干細(xì)胞途徑二、人工染色體技術(shù) 參考文獻(xiàn) 第五章轉(zhuǎn)基因豬的檢測(cè) 第一節(jié) 可視化識(shí)別檢測(cè) 一、熒光標(biāo)記二、膚色標(biāo)記第二節(jié) 整合檢測(cè) 一、樣品的采集二、DNA的提取三、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR) 四、DNA斑點(diǎn)雜交五、Southerln印記雜交六、外源基因整合位點(diǎn)的檢測(cè)染色體原位雜交技術(shù) 七、轉(zhuǎn)基因整合拷貝數(shù)的測(cè)定第三節(jié) 轉(zhuǎn)基因豬外源基因的轉(zhuǎn)錄分析mRNA檢測(cè) 一、組織或細(xì)胞中總RNA提取二、Northern印跡雜交三、RNase保護(hù)分析四、逆轉(zhuǎn)錄一聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RTPCR) 五、RNA斑點(diǎn)雜交第四節(jié) 轉(zhuǎn)基因豬翻譯水平蛋白質(zhì)產(chǎn)物檢測(cè) 一、蛋白質(zhì)印跡技術(shù) 二、免疫組織化學(xué)檢測(cè) 第五節(jié) 轉(zhuǎn)基因豬表達(dá)產(chǎn)物的生物活性分析及功能測(cè)試一、表達(dá)產(chǎn)物的生物活性分析二、表達(dá)產(chǎn)物的功能測(cè)試參考文獻(xiàn) 第六章轉(zhuǎn)基因豬的安全調(diào)控技術(shù) 第一節(jié) 轉(zhuǎn)基因豬的安全性分析及解決方案一、轉(zhuǎn)基因豬對(duì)食品均安全性分析及解決方案二、轉(zhuǎn)基因豬對(duì)環(huán)境的安全性分析及解決方案三、轉(zhuǎn)基因豬自身的安全性分析及解決方案第二節(jié) 標(biāo)記基因的刪除技術(shù) 一、hit and run法二、雙置換法三、位點(diǎn)特異性重組技術(shù) 第三節(jié) 組織特異性表達(dá) 第四節(jié) 外源基因的誘導(dǎo)表達(dá) 一、四環(huán)素誘導(dǎo)表達(dá)系統(tǒng) 二、蛻皮激素誘導(dǎo)表達(dá)系統(tǒng) 三、他克莫司／雷帕霉素誘導(dǎo)系統(tǒng) 四、RU486誘導(dǎo)系統(tǒng) 參考文獻(xiàn) 第七章轉(zhuǎn)基因豬新品種培育第一節(jié) 外源基因在G0代中的整合狀況及遺傳穩(wěn)定性一、隨機(jī)整合二、定位整合第二節(jié) G0代轉(zhuǎn)基因豬的選擇一、選擇的內(nèi)容和目標(biāo) 二、選擇程序第三節(jié) 轉(zhuǎn)基因豬純合子的建立一、通過(guò)常規(guī)繁育技術(shù)建立轉(zhuǎn)基因豬純合子二、通過(guò)重復(fù)打靶技術(shù)建立轉(zhuǎn)基因豬純合子三、基因編輯技術(shù) 第四節(jié) 轉(zhuǎn)基因豬新品種的培育一、轉(zhuǎn)基因豬新品種的培育目標(biāo) 二、轉(zhuǎn)基因豬新品系的建立三、轉(zhuǎn)基因豬新品種的建立四、轉(zhuǎn)基因豬新品種的利用五、轉(zhuǎn)基因豬種質(zhì)資源的保存參考文獻(xiàn) 第八章轉(zhuǎn)基因豬的安全管理和安全評(píng)價(jià) 第一節(jié) 我國(guó)農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物的安全管理體系一、我國(guó)農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全管理的法規(guī)建設(shè) 二、我國(guó)農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物的管理和監(jiān)控體系第二節(jié) 轉(zhuǎn)基因豬的安全控制一、轉(zhuǎn)基因?qū)嶒?yàn)豬場(chǎng)的安全控制二、轉(zhuǎn)基因?qū)嶒?yàn)豬場(chǎng)的衛(wèi)生防疫三、轉(zhuǎn)基因?qū)嶒?yàn)豬場(chǎng)豬群處置規(guī)則第三節(jié) 轉(zhuǎn)基因豬的安全評(píng)價(jià) 一、轉(zhuǎn)基因豬安全評(píng)價(jià)的內(nèi)容二、各階段的申報(bào)程序參考文獻(xiàn)