現(xiàn)代生物技術實驗教程

緒論

章 微生物學實驗技術
節(jié) 微生物學基本實驗技術 4
實驗一 普通光學顯微鏡的構造、性能及使用方法4
實驗二 細菌涂片及革蘭氏染色與芽孢染色法 10
實驗三 放線菌與霉菌制片及形態(tài)觀察 14
拓展閱讀 1910年諾貝爾生理學或醫(yī)學獎：核酸的化學組成  19
實驗四 酵母菌形態(tài)及死活細胞的染色鑒別 19
實驗五 酵母菌細胞大小、細胞總數(shù)及出芽率的測定 20
拓展閱讀 1962年諾貝爾生理學或醫(yī)學獎：DNA雙螺旋結(jié)構的發(fā)現(xiàn)  26
實驗六 酵母菌子囊孢子的觀察 27
實驗七 培養(yǎng)基制備 28
實驗八 常用滅菌方法 31
（一）干熱滅菌法  31
（二）高壓蒸汽滅菌  33
拓展閱讀 1968 年諾貝爾生理學或醫(yī)學獎：遺傳密碼與蛋白質(zhì)合成  36
實驗九 微生物的分離與純化 36
第二節(jié) 微生物學綜合研究型實驗  41
實驗一 空氣中微生物的測定和計數(shù) 41
思政小課堂“共和國勛章”獲得者：鐘南山  44
實驗二 樣品中菌落總數(shù)和大腸菌群數(shù)的檢測 45
（一）樣品中菌落總數(shù)的檢測  45
（二）樣品中大腸菌群數(shù)的檢測  48
思政小課堂“人民英雄”國家榮譽稱號獲得者：張伯禮  52
實驗三 微生物的生理生化特性試驗 53
（一）大分子物質(zhì)的水解試驗  53
（二）糖發(fā)酵試驗  57
（三）IMViC試驗與硫化氫試驗  59
思政小課堂“共和國勛章”獲得者：袁隆平  62

第二章 細胞生物學實驗技術
節(jié) 細胞生物學基本實驗技術 63
實驗一 細胞膜的滲透性 63
拓展閱讀 1974年諾貝爾生理學或醫(yī)學獎：細胞結(jié)構和功能組織的發(fā)現(xiàn)  65
實驗二 血細胞觀察和人 ABO血型鑒定  65
實驗三 生物組織石蠟切片技術 69
實驗四 蘇木精-伊紅染色法  72
實驗五 DNA的顯示 ——Feulgen反應  75
拓展閱讀 1978年諾貝爾生理學或醫(yī)學獎：限制性內(nèi)切酶  77
實驗六 細胞內(nèi) DNA和 RNA的區(qū)分顯示  78
拓展閱讀 1989年諾貝爾生理學或醫(yī)學獎：逆轉(zhuǎn)錄病毒癌基因及其細胞起源  80
實驗七 細胞內(nèi)堿性蛋白質(zhì)和酸性蛋白質(zhì)的顯示 80
拓展閱讀 1994年諾貝爾生理學或醫(yī)學獎：G蛋白及其在細胞轉(zhuǎn)導中的作用  82
實驗八 細胞內(nèi)過氧化物酶的顯示 82
實驗九 過碘酸希夫反應（PAS） ——顯示細胞內(nèi)糖原  84
拓展閱讀 1997年諾貝爾化學獎：合成三磷酸腺苷的酶促機理  85
實驗十 蘇丹Ⅲ染色——顯示細胞內(nèi)脂肪 86
第二節(jié) 細胞生物學綜合研究型實驗 88
實驗一 小鼠骨髓染色體標本的制備與觀察 88
思政小課堂“共和國勛章”獲得者：屠呦呦  90
實驗二 動植物細胞骨架的玻片制備方法和觀察 90
實驗三 動物細胞的傳代培養(yǎng) 92
思政小課堂“人民英雄”國家榮譽稱號獲得者：陳薇  96
實驗四 植物細胞的有絲分裂 96

第三章 分子生物學實驗技術
節(jié) 分子生物學基礎實驗技術  99
實驗一 聚合酶鏈式反應（PCR）  99
拓展閱讀 1993年諾貝爾生理學或醫(yī)學獎：PCR技術  101
實驗二 DNA瓊脂糖凝膠電泳  101
實驗三 DNA酶切及片段回收  103
實驗四 DNA重組  106
拓展閱讀 2002年諾貝爾生理學或醫(yī)學獎：器官發(fā)育和程序性細胞死亡的基因調(diào)節(jié)  107
實驗五 大腸桿菌化學感受態(tài)的制備及質(zhì)粒 DNA轉(zhuǎn)化  108
實驗六 質(zhì)粒提取及電泳分析 110
拓展閱讀 2020年諾貝爾生理學或醫(yī)學獎：丙型肝炎病毒的發(fā)現(xiàn)  112
實驗七 重組子的藍白斑篩選 113
第二節(jié) 分子生物學綜合研究型實驗  114
葡萄功能基因表達載體的構建 114
Ⅰ葡萄組織總RNA提?。x心柱法）  114
思政小課堂“人民英雄”國家榮譽稱號獲得者：張定宇  116
ⅡRNA質(zhì)量及濃度檢測  117
ⅢRT-PCR及目的產(chǎn)物回收  118
Ⅳ目的產(chǎn)物與克隆載體連接、轉(zhuǎn)化及陽性克隆重組子的篩選 120
Ⅴ克隆重組子及表達載體酶切、連接、轉(zhuǎn)化及表達重組子篩選 122

參考書目 124